最后，害死蝶妃的幕后黑手被怀疑是皇后王氏。
有人推断称皇后近年来与蝶妃之间关系逐渐恶化，其早已不满蝶妃独占皇上的宠爱，在宫中不把她这外皇后放在眼里，更仗着也是出生王家，想将皇后之位取而代之。
为免后位被夺，太子之位易主，皇后决定先下手为强，故派太医韩昀和安排在蝶妃身边的内应宫女里应外合，一举下毒毒害了蝶妃。
虽然这一推论证据不足，然而动机却符合。
加之当时皇后对蝶妃确实过于苛刻严厉，以至人人都认定了蝶妃乃皇后所害，皇帝更是将皇后软禁中宫，派刑部和大理寺一同彻查此案，最终在那名被皇后派至蝶妃身边的宫女房内，搜出了一支藏有残留毒药的空心发簪。
经验查，那发簪内残留的毒药与蝶妃死前所服下的剧毒毒性一致，显然是有人事先将毒药藏在发簪之中，再神不知鬼不觉地放到蝶妃所服用的药里，致使蝶妃中毒身亡。
碍于那名宫女已死，无法判断毒药从何而来，也无法断定其是受皇后指使而毒害蝶妃，故而也无法认定皇后便是毒害蝶妃的幕后之人。